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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:SPEEDYPURE快速質(zhì)粒小提試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào): 200T
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:690
  • 產(chǎn)品庫(kù)存:149
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
SPEEDYPURE快速質(zhì)粒小提試劑盒本試劑盒用于質(zhì)粒 DNA 的小量快速制備。在經(jīng)典堿裂解法提取質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行改 進(jìn)優(yōu)化,可視化操作,可在 10 min 之內(nèi)完成提取任務(wù),大大降低了提取時(shí)間。質(zhì)粒可從 菌體中快速釋放,并特異、高效地被離心吸附柱吸附。所得質(zhì)粒可直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、 PCR 、實(shí)時(shí)熒光定量,測(cè)序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
詳情介紹:
產(chǎn)品及特點(diǎn)
試劑盒用于質(zhì)粒 DNA 的小量快速制備。在經(jīng)典堿裂解法提取質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行改 進(jìn)優(yōu)化,可視化操作,可在 10 min 之內(nèi)完成提取任務(wù),大大降低了提取時(shí)間。質(zhì)粒可從 菌體中快速釋放,并特異、高效地被離心吸附柱吸附。所得質(zhì)粒可直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、 PCR 、實(shí)時(shí)熒光定量,測(cè)序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

它具有下列特點(diǎn):
1. 快捷、高效:可視化操作,簡(jiǎn)便高效,節(jié)約時(shí)間;
2. 純度高:沉淀致密,去雜干凈。

成分規(guī)格

Buffer S1(紫紅色)

15ml

30ml

60ml

Buffer EB

10ml

10ml

30ml

Buffer S2

15ml

30ml

60ml

Buffer S5

20ml

40ml

80ml

Buffer W2(concentrate)

15ml

30ml

60ml

RNase A (10 mg/ml)

150μl

300μl

600μl

Spin Column with Collection Tubes

50套

100套

200套

注意:使用前將全部 RNase A 溶液加到 Buffer S1 中混合均勻,2 - 8℃保存;按要求在 Buffer W2   中加入無(wú)水乙醇

本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于其它用途


保存條件
在室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存 12 個(gè)月;更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于 2-8℃ 。若溶 液產(chǎn)生沉淀,應(yīng)在使用前置于37℃下溶解沉淀。加入 RNase A 后的 Buffer S1 應(yīng)置于 2-8℃ 保存,可穩(wěn)定保存 6 個(gè)月。

使用方法
1. 取1- 4 ml 過(guò)夜培養(yǎng)的菌液,室溫12,000 rpm離心1 min ,盡量將上清去除干凈。
注 意:根據(jù)菌液的濃度決定取液量,濃度高時(shí)取 1.5 ml 菌液離心即可,濃度低時(shí)可多收集一次)
2. 加入 200 μl Buffer S1 ,旋渦震蕩或用移液器充分吹打使菌體重懸均勻,呈現(xiàn)出均勻混 濁的棕紅色。
注 意:菌體沉淀一定要懸浮均勻,如有未徹底懸浮的菌塊會(huì)影響裂解,導(dǎo)致提取的質(zhì)粒濃度及純度降低)
3. 加入 200 μl Buffer S2 ,溫和顛倒混勻使菌體完全裂解,直到溶液變成清亮、粘稠的紫紅色。
注 意:不可劇烈震蕩, 以免造成基因組 DNA 片段的污染)
4. 加入 350 μl Buffer S5 ,立即溫和顛倒混勻,可見(jiàn)紅黃相間的沉淀物產(chǎn)生,繼續(xù)混勻直到完全變?yōu)辄S色,然后 12,000 rpm離心3 min。
注 意:Buffer S5 加入后應(yīng)立即混合,避免產(chǎn)生局部沉淀,如果上清中還有紫色漂浮物,說(shuō)明復(fù)性不充分,繼續(xù)混勻至溶液顏色完全變?yōu)槌吻宓狞S色)
5. 小心將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12,000 rpm 離心30 sec ,棄收集管中濾液。
6. 加入 600 μl Buffer W2 ,室溫 12,000 rpm 離心30sec,棄收集管中濾液。
注 意:Buffer W2為濃縮液,按要求加入無(wú)水乙醇,用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋,以防酒精揮發(fā))
7. 干燥。將離心吸附柱于 12,000 rpm 離心 2 min ,甩干殘留漂洗液。
注 意:此步不能省略,否則殘留乙醇會(huì)影響質(zhì)粒的后續(xù)使用)
8. 將吸附柱置于一新的無(wú)菌 1.5 ml 離心管(自備)中,加入 50 - 100 μl 的洗脫液Buffer EB, 室溫 12,000 rpm 離心 1 min ,離心管底溶液即質(zhì)粒 DNA。

注意事項(xiàng)
1. xi菌培養(yǎng)時(shí)間一般為 12 - 16 小時(shí),如接種量大則應(yīng)減少培養(yǎng)時(shí)間,過(guò)度培養(yǎng)會(huì)降低質(zhì) 粒質(zhì)量甚至導(dǎo)致質(zhì)粒 DNA 突變。
2. 每次使用時(shí)都要注意 Buffer S2 和 S5 是否形成沉淀,如有沉淀37℃溶解后再用。
3. 質(zhì)粒的產(chǎn)量跟 xi菌量、質(zhì)粒拷貝數(shù)、質(zhì)粒大小和操作規(guī)范程度密切相關(guān),一般1.5 ml 過(guò) 夜培養(yǎng)菌體可收獲約 10μg 高拷貝質(zhì)粒。

SPEEDYPURE快速質(zhì)粒小提試劑盒
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